În experimentele de reacție în lanț a polimerazei (PCR), ambalarea reactivilor și eșantioanelor afectează direct exactitatea și siguranța rezultatelor experimentale. Procedurile standard de ambalare PCR trebuie să respecte cu strictețe principiile de sterilitate, prevenirea contaminării și etichetarea clară. Proceduri specifice sunt prezentate mai jos.
1. Pregătire
Înainte de a continua, purtați un strat de laborator, mănuși și o mască pentru a asigura un mediu curat (este recomandat o bancă curată sau un dulap de biosecuritate). Verificați dacă toate consumabilele (de exemplu, tuburi de centrifugă, plăci PCR) sunt lipsite de contaminare DNază/RNază și utilizați autoclave sau enzime - sterilizatoare libere. Reactivii (de exemplu, primerii, ADN -ul de șablon, enzimele etc.) trebuie alicotate în flacoane individuale pentru a evita înghețarea repetată - cicluri de deghiere.
2. Aliquoting și etichetare
Reactivi de alicotare: Utilizați o pipetă pentru a distribui amestecul principal, primerii, etc. în tuburi de centrifugă sau puțuri de plăci PCR în funcție de nevoile experimentale, distribuind cu exactitate fiecare volum la cel mai apropiat microlitru. Utilizați sfaturi de pipetă de unică folosință pentru a evita contaminarea încrucișată -.
Standarde de etichetare: Toate containerele trebuie să fie etichetate în mod clar cu numele, concentrarea, data și numărul operatorului. Etichetele impermeabile sau gravura directă sunt recomandate pentru a preveni marcajele ilecibile.
3. Ambalaj și sigilare
După alicot, strângeți imediat capacele tubului de centrifugă sau sigilați plăcile PCR (folosind căldură - peliculă de etanșare sau film adeziv specializat) pentru a preveni scurgerea. Pentru depozitare pe termen lung -, este recomandat să așezați ambalajul într -o pungă sigilată și să adăugați un desicant (cum ar fi mărgelele de silicagel) pentru a menține un mediu uscat.
4. Depozitare și transport
După ambalare, reactivii PCR trebuie stocați separat la - 20 grade (lung - termen) sau 4 grade (pe termen scurt) pentru a evita fluctuațiile de temperatură. Transportul trebuie efectuat într -un recipient izolat umplut cu material de amortizare pentru a preveni șocul și scurgerea. Pentru eșantioane biohazard, este necesară respectarea cerințelor de ambalare a biosecurității în conformitate cu ONU 3373 sau reglementări relevante.
Procedurile standardizate de ambalare PCR sunt esențiale pentru fiabilitatea experimentală. Controlul aseptic strict și etichetarea clară pot reduce eficient riscurile de contaminare și pot asigura exactitatea datelor.
